除了濃縮血小板 (platelet rich plasma, PRP) 有品質指標,骨髓抽吸濃縮液 (bone marrow aspiration concentrate, BMAC) 的品質好壞也很重要,基本上BMAC的品質最終取決於其中間質幹細胞 (Mesenchymal Stem Cells, MSCs) 的數量與活性,可惜的是這類細胞無法透過6分類驗血機 (6-part differential hematology analyzer) 直接測得。
然而根據文獻,6分類驗血機在BMAC製備過程中,也是有其角色,它主要用於品管 (QC) 和成分鑑定,確保濃縮過程有效,並評估最終產物的促再生潛力與發炎風險。以下是依據文獻及相關骨科生物製劑研究 [1],統整出6分類驗血機能提供的關鍵BMAC品質指標:
🔬 6分類驗血機可測得的BMAC關鍵品質指標
6分類驗血機(或稱全血球計數儀, CBC/DC analyzer)主要提供以下四大類關鍵指標:「劑量」、「純度」、「發炎風險」與「再生潛力」,用以評估BMAC的品質。
1. 總核細胞計數 (Total Nucleated Cells, TNC)
這是評估BMAC「細胞總劑量」最基礎也最重要的指標。
檢測項目: WBC (白血球計數)
臨床意義: 在骨髓濃縮液中,此數值代表「所有帶有細胞核的細胞總數」,這不僅是白血球,也包含了我們真正想要的幹細胞/前驅細胞(如 MSCs, HSCs)。
品質指標: 越高越好。
文獻觀點: TNC 常用作 MSC 數量的「替代指標 (proxy indicator)」。雖然 MSCs 只佔 TNC 的極小部分(約 0.001% - 0.01%)[2],但高 TNC 濃度被認為是成功濃縮的標誌,並與較佳的臨床結果相關。
2. 血小板計數 (Platelet, PLT)
這也是評估BMAC「生長因子劑量」的關鍵指標。
檢測項目: PLT (血小板計數)
臨床意義: 平均來說,骨髓 (BMA)中的血小板低於全血 [3],所以濃縮後的血小板濃度會低於PRP。但因其富含多種生長因子(如 PDGF, TGF-β),以及輔助刺激未分化的間質細胞 (MSCs)增生 [4],是啟動組織修復的關鍵,所以我們習慣會添加PRP以輔助BMAC。
品質指標: 越高越好。
文獻觀點: 高濃度的血小板能提供豐富的生長因子,協同幹細胞促進組織再生。
3. 紅血球/血容比 (RBC / HCT)
這是評估BMAC「純度」的關鍵指標,或稱為「負面指標」。
檢測項目: RBC (紅血球計數) 或 HCT (血容比)
臨床意義: 理想的BMAC製備過程應盡可能去除紅血球。
品質指標: 越低越好。
文獻觀點: 文獻指出,高濃度的紅血球(高HCT)不僅會稀釋有效成分的濃度,其釋放的游離血紅素和鐵離子更具有細胞毒性,可能抑制 MSC 的增生並引起強烈的發炎反應,導致術後疼痛加劇 [5]。
4. 白血球分類 (Leukocyte Differential)
這是「6分類」驗血機最核心的功能,用以評估BMAC的「發炎風險」與「再生潛力」特性。
這項指標將TNC(或WBC)細分為以下關鍵族群:
A. 嗜中性球 (Neutrophils, NEU)
臨床意義: 這是促進發炎的主要細胞。
品質指標: 越低越好(尤其在關節內注射時)。
文獻觀點: 大量研究(特別是PRP領域,其原理與BMAC共通)指出,高濃度的嗜中性球會釋放破壞性的酵素(如MMPs)和活性氧 (ROS),可能導致組織的分解代謝 (catabolic effect),加劇注射後疼痛和發炎。
B. 單核球 (Monocytes, MONO)
臨床意義: 促進再生的關鍵調控細胞。
品質指標: 越高越好。
文獻觀點: 單核球是再生醫學中非常受重視的細胞。它們會轉化為巨噬細胞 (Macrophages),並從M1型(促發炎)轉換為M2型(抗發炎/促修復),主導組織的重塑與再生 [6]。
C. 淋巴球 (Lymphocytes, LYM)
臨床意義: 免疫調控細胞。
品質指標: 一般認為是中性或有益的。
文獻觀點: 淋巴球(連同單核球)同屬單核細胞 (Mononuclear Cells, MNCs)。高MNCs比例被認為是有益的。
總結:6分類驗血機的品管標準
當我們使用6分類驗血機來評估一份BMAC的品質時,一份高品質的濃縮液應具備以下特徵,讓醫師能了解注射物的細胞組成與增生潛力:
參考文獻
1. Gaul, F., et al., A Review of Commercially Available Point-of-Care Devices to Concentrate Bone Marrow for the Treatment of Osteoarthritis and Focal Cartilage Lesions. Cartilage, 2019. 10(4): p. 387–394.
2. Jeyaraman, M., et al., Impact of the Process Variables on the Yield of Mesenchymal Stromal Cells from Bone Marrow Aspirate Concentrate. Bioengineering (Basel), 2022. 9(2).
3. Zhong, W., et al., In vivo comparison of the bone regeneration capability of human bone marrow concentrates vs. platelet-rich plasma. PLoS One, 2012. 7(7): p. e40833.
4. Everts, P., et al., Platelet-Rich Plasma: New Performance Understandings and Therapeutic Considerations in 2020. Int J Mol Sci, 2020. 21(20).
5. Everts, P.A., et al., Assessing clinical implications and perspectives of the pathophysiological effects of erythrocytes and plasma free hemoglobin in autologous biologics for use in musculoskeletal regenerative medicine therapies. A review. Regen Ther, 2019. 11: p. 56–64.
6. Perez, S. and S. Rius-Perez, Macrophage Polarization and Reprogramming in Acute Inflammation: A Redox Perspective. Antioxidants (Basel), 2022. 11(7).